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山羊傳染性胸膜肺炎的診斷

發(fā)布時間:2016-05-24 16:09    作者:牧通人才網(wǎng)    來源:    查看:
    山羊傳染性胸膜肺炎是山羊特有的接觸性傳染病,,以發(fā)熱、咳嗽,,出現(xiàn)漿液性,、纖維蛋白滲出性肺炎和胸膜炎為特征,。病原為山羊支原體山羊肺炎亞種,是一種細(xì)小,、多形性的微生物,,平均大小為0.3~0.5um,革蘭氏染色陰性,。專屬需氧菌,要有特別的培養(yǎng)基才能生長,。 雞胚卵黃或尿囊均適合于該菌生長,。

    1  病理學(xué)診斷

   (1)病理剖檢變化。病變多局限于胸部,。胸腔常有淡黃色液體,,有時多至500~2000mL,暴露于空氣后發(fā)生纖維蛋白凝結(jié),。急性病例的損害多為一側(cè),,間或兩側(cè)有纖維蛋白性肺炎。肺變區(qū)凸出于肺表,,顏色由紅至灰不等,,切面呈大理石樣。纖維蛋白滲出液的充盈使得肺小葉間組織變寬,,小葉界限明顯,,支氣管擴(kuò)張。血管內(nèi)形成血栓,。胸膜變厚而粗糙,,上有黃白色纖維蛋白附著,直至胸膜與肋膜、心包發(fā)生粘連,。支氣管淋巴結(jié)和縱膈淋巴結(jié)腫大,,切面多汁并有溢血點(diǎn)。心包積液,,心肌松弛變軟,。急性病例還可見肝、脾腫大,,膽囊腫脹,,腎腫大和被膜下小點(diǎn)溢血。

   (2)病理組織學(xué)變化,。前驅(qū)期的病理變化主要表現(xiàn)為多發(fā)性支氣管肺炎,,在鏡檢時可在肺炎灶與正常組織之間的間質(zhì)中見到炎性水腫和淋巴管炎引起的小葉間質(zhì)擴(kuò)張。肺炎灶中呼吸細(xì)支氣管上皮脫落,,腔內(nèi)有多量滲出物,,支氣管周圍的肺泡內(nèi)有滲出的漿液,嗜中性粒細(xì)胞,、單核細(xì)胞,、紅細(xì)胞及脫落的肺泡上皮細(xì)胞、肺泡壁毛細(xì)血管充血,。臨床明顯期的病理變化主要表現(xiàn)為纖維素性融合性肺炎和漿液纖維素性胸膜炎,。在充血水腫期鏡檢可見肺泡壁毛細(xì)血管高度擴(kuò)張、充血,,肺泡內(nèi)存有大量染成粉紅色的漿液,,并有少量紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞及組織細(xì)胞等,。在紅色肝變期鏡檢可見肺泡內(nèi)充滿大量纖維素,,其中混有大量紅細(xì)胞和數(shù)量不等的嗜中性粒細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞和脫落的上皮細(xì)胞,。肺泡壁的毛細(xì)血管高度擴(kuò)張,、充血?;疑巫兤阽R檢,,肺泡內(nèi)除可見有大量絲網(wǎng)狀纖維蛋白外,尚可見嗜中性粒細(xì)胞,、單核細(xì)胞的數(shù)量顯著增多,,肺泡壁毛細(xì)血管充血減弱,肺泡內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量大為減少,。在發(fā)生壞死時,,鏡檢可見細(xì)胞核破碎溶解,、胞漿凝固,但壞死細(xì)胞和組織輪廓尚能辨認(rèn),。在肺間質(zhì)內(nèi)鏡檢可見小葉邊緣的壞死灶,。當(dāng)血管壁壞死時可見血管壁變性、壞死及其周圍浸潤細(xì)胞發(fā)生核崩解,,血管內(nèi)有血栓形成,。在間質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)壞死的同時或稍后,于血管周圍和壞死部位可見機(jī)化灶出現(xiàn),。鏡檢可見機(jī)化灶中心為一個或幾個大小不等的小血管,,周圍為新生的肉芽組織,其中混有一定數(shù)量的白細(xì)胞,,其外周為透明區(qū),,透明區(qū)外周為核破碎的壞死區(qū)。機(jī)化灶是該病特有的病理變化,,在病理組織學(xué)上具有重要的診斷意義,。在肺臟呈現(xiàn)上述病變的同時,一般還可以看到胸膜炎的變化,。鏡檢可見漿膜表面附著有大量纖維素,,其中混有一定數(shù)量的白細(xì)胞。漿膜下炎性水腫,,淋巴管擴(kuò)張,、淋巴栓形成,血管炎和血栓形成,,膠原纖維呈纖維素樣壞死,。

    2  血清學(xué)診斷

    常用的方法有瓊脂免疫擴(kuò)散試驗、玻片凝集試驗和熒光抗體試驗等,。直接免疫熒光試驗操作方法如下。

   (1)材料準(zhǔn)備,。器材有熒光顯微鏡,、載玻片、蓋玻片,、溫箱及滴管等,,熒光抗體(FA)由指定單位供應(yīng)。

   (2)操作方法,。熒光抗體效價測定,。準(zhǔn)備8支小試管,第1管加 PBS 1.8mL,,其余7管每管加PBS 1mL,。向第1管加熒光抗體0.2mL,,混合后從中取1mL加到第2管,以后由此類推,。得到1∶10~1∶1280不同對倍稀釋的熒光抗體,。然后取長好單個菌落的與抗血清相對應(yīng)的支原體瓊脂平皿培養(yǎng)物,加入約5mL的PBS,,置室溫下半小時,,吸棄PBS,再用鏟刀切取瓊脂培養(yǎng)物8塊,,每塊約lcm2,,分置于載玻片上。另準(zhǔn)備平皿,,放入濕濾紙,,將兩根玻棒平行放在濕濾紙上,再將有瓊脂塊的載玻片擱在玻棒上,。然后將8個不同稀釋度的熒光抗體分別滴到8個瓊脂塊上,,每塊1~2滴,并作稀釋度的標(biāo)記,,蓋上平皿蓋,。置室溫下半小時,取出平皿,,用PBS輕洗瓊脂表面,,用入射式光源顯微鏡找到菌落,再用汞燈觀察熒光,。出現(xiàn)特異性熒光的最高稀釋度為該熒光抗體效價,,使用時用2倍或4倍的效價。標(biāo)本片的制備,。取長好單個菌落的支原體瓊脂平皿培養(yǎng)物加入約5mL的PBS,,置室溫下半小時,吸棄PBS,,再用鏟刀切取瓊脂培養(yǎng)物,,置于載玻片上。染色,。將稀釋至工作濃度的FA,,滴加在標(biāo)本面上,室溫恒濕染色,,取PBS輕洗瓊脂表面數(shù)次,,熒光顯微鏡下觀察。

   (3)結(jié)果判定,。在熒光顯微鏡下檢查,,被檢標(biāo)本的細(xì)菌結(jié)構(gòu)完整清晰,,并在陽性、陰性對照均成立時判定,。在菌體中見到特異蘋果綠色熒光判定為陽性,;如果所有菌體中無特異性熒光,則判定為陰性,。

   (靳連平  遼寧省綏中縣前衛(wèi)動物衛(wèi)生監(jiān)督所)

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