布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的人畜共患傳染病。該病在家畜中以羊,、牛,、豬最易感,,造成患病家畜生殖器官和胎膜發(fā)炎,引起流產,、不育和各種組織病變,,患病公畜則表現為關節(jié)炎和睪丸炎。人感染后的表現較為復雜,,大多出現波浪熱,、關節(jié)疼痛、睪丸炎及子宮內膜炎等癥狀,。
1 流行病學
該病的傳染性極強,,易感動物范圍很廣,羊,、牛,、豬,、牦牛、鹿,、駱駝,、野豬、馬,、狗,、狐、狼,、野牛,、野兔、猴,、羚羊,、雞、鴨及一些嚙齒動物均能感染,,而羊,、牛、豬最易感,。傳染源是病畜及帶菌動物,,主要感染途徑是消化道,即通過污染的飼料與飲水而感染,,也能通過皮膚,、結膜和交配等感染。人接觸病畜及其產品,,如接產,、飲用病畜生乳或制品、食用未經煮透的病畜肉等都能感染,。
2 活體檢疫
母畜最顯著的癥狀是流產,,可發(fā)生于妊娠期任何階段,但牛常發(fā)生于懷孕后的6~8個月,、羊3~4個月,、豬1~3個月。流產前精神和食欲不振,,陰唇和乳房腫脹,,陰道黏膜紅腫,流出不潔的分泌物,。流產后胎衣往往停滯,,胎兒死亡,常發(fā)生子宮炎,長期不愈,,屢配不孕,,失去生育能力。公畜發(fā)病的癥狀是睪丸炎和副睪炎,。
3 肉尸檢疫
該病的明顯病變在子宮、胎兒及胎衣,。胎衣呈黃色膠凍樣浸潤,,有的部位覆有纖維素片和膿液,有的增厚并有出血斑點,。胎兒呈現敗血癥變化,。胃特別是第四胃有淡黃色或白色黏液絮狀物。淋巴結,、脾臟和肝臟呈現不同的腫脹,,出現散在壞死灶。公畜睪丸和副睪有炎性壞死灶和化膿灶,。該病的明顯癥狀是流產,,但是彎桿菌病、胎兒滴蟲病,、鉤端螺旋體病,、乙型腦炎、衣原體病,、豬細小病毒病和藍耳病都能發(fā)生流產,,因此必須通過實驗室檢驗與之鑒別。
4 實驗室檢驗
布氏桿菌病檢疫的檢驗方法有病原學檢查和血清學檢查兩種,。動物檢疫常采用的血清學方法有虎紅平板凝集試驗,、乳牛布氏桿菌病全乳環(huán)狀試驗、試管凝集試驗和補體結合試驗等,。前兩者主要用于動物檢疫的篩選,,后兩者主要用于布氏桿菌病的定性。
(1)虎紅平板凝集試驗,。適用于各種家畜布氏桿菌病篩選試驗,。出現陽性反應的血清樣品,應根據情況進行試管凝集試驗或補體結合試驗,,或布氏桿菌病其他診斷試驗確定,。
材料準備。準備好虎紅抗原(由獸醫(yī)生物藥品廠供應),,按說明書使用,。抗原宜在4~15℃冰箱保存,,不能凍結,。其外觀應呈玫瑰紅色的懸浮液,,有凝集者棄之。使用前充分搖勻,,置室溫中30~60分鐘,。標準陰、陽性血清由獸醫(yī)生物藥品廠供應,。被檢血清須新鮮,、無溶血、無腐敗現象,,保存期不超過15日,。
實驗方法。取一潔凈的玻璃板,,畫成20mm×20mm的方格,。每一格分別滴入被檢血清約0.03mL,然后在被檢血清旁滴加虎紅抗原0.0mL(使用時先將抗原瓶搖動,,使之均勻懸?。醚篮灮蛐“魯噭友搴涂乖?,使抗原液混合,。于4分鐘內觀察結果。結果判定,。如果在4分鐘內出現肉眼可見的凝集現象者判為陽性,,否則判為陰性。
(2)乳牛布氏桿菌病全乳環(huán)狀試驗(MRT),。該方法適用于乳牛場泌乳母牛布魯氏菌病的監(jiān)測和篩選試驗,。受檢乳必須為新鮮的全脂乳。對患有乳房疾病的乳汁,、加工處理后的牛乳,、腐敗變質和凍結過的乳不能使用。采集乳樣時應將母畜的乳房用溫水洗凈,,再用紗布擦干,,然后擠于潔凈的器皿中。夏季應于當天檢查,,若保存于2℃,7天內仍可使用,。
材料準備,。事先準備好布氏桿菌病全乳環(huán)狀抗原(由獸醫(yī)生物藥品廠供應)。目前我國生產的全乳環(huán)狀反應抗原有兩種,,一種是蘇木素染色抗原,呈藍色,;另一種是四氮唑染色抗原,,呈紅色,。試驗結果均按乳脂和乳柱的顏色判定。其他器材包括凝集試驗管,、試管架,、吸管,、微量加樣器和水浴箱等,。
實驗方法。取乳樣1mL加入滅菌凝集試驗管,。將全乳環(huán)狀抗原充分搖蕩均勻后取1滴(約50uL)加入乳樣中充分混勻,置37~38℃水浴中60分鐘,。取出后勿振蕩,,立即按乳脂和乳柱的顏色進行判定,。
結果判定。乳柱上層乳脂形成紅色或藍色環(huán)帶,、乳柱白色、分界分明的為強陽性反應,。乳脂層的環(huán)帶雖呈紅色或藍色,,但不顯著,,乳柱略帶顏色為陽性反應。乳脂層的環(huán)帶顏色較淺,,但比乳柱顏色略深為弱陽性反應。乳始層環(huán)帶不明顯,與乳柱分界不清,,乳柱不褪色為疑似反應。 乳柱上層無變化,,乳柱顏色均勻為陰性反應,。脂肪較少或無脂肪的乳樣呈陽性反應時,,菌體呈凝集現象下沉管底,判定時以乳柱的反應為準,。
由于布氏桿菌病是人畜共患病,是威脅畜牧或獸醫(yī)從業(yè)者的一種嚴重的職業(yè)病,,必須引起重視,在生產中要做好該病的檢疫工作,,及時淘汰感染和發(fā)病動物,并注意做好自身的防護工作,。
(孟慶彤,、王美玲 遼寧省彰武縣動物疫病預防控制中心)