1 流行病學(xué)
該病的傳播為水平傳播,其傳播途徑為消化道和呼吸道,。乳腺和肺臟是病毒排出的主要通道,。實(shí)驗觀察發(fā)現(xiàn),在梅迪-維斯納病發(fā)病率高的羊圈內(nèi)出生的羔羊,,于出生當(dāng)時及出生后10小時,、6周和1年后隔離,然后觀察8年,,結(jié)果于出生當(dāng)時被隔離的羔羊未觀察到感染,,而其他3群分別有28%、75%和81%出現(xiàn)癥狀,。在感染雙親的羊圈內(nèi)生活的時間越長,,發(fā)病率越高,病情越嚴(yán)重,。該病也可經(jīng)呼吸道的飛沫傳播,,攝入被病毒污染的牧草也可引起感染。羊的性別和年齡對該病的易感性無直接影響,。易感綿羊經(jīng)肺內(nèi)注射病羊的肺細(xì)胞和分泌物也能實(shí)驗性地傳播該病,。
2 臨床癥狀
該病的潛伏期通常在2~3年以上。病羊首先表現(xiàn)為掉群,,同時出現(xiàn)干咳并逐漸消瘦,,呼吸困難日益明顯,病情進(jìn)行性加重,,直到死亡,。維斯納病病羊最初表現(xiàn)為步樣異常、運(yùn)動失調(diào)和輕癱,,尤其是后肢更為明顯,。有時可見頭部呈異常姿態(tài),唇或顏面肌震顫,。病情緩慢增進(jìn)和惡化,,最后陷入對稱性麻痹而死亡,。
3 病理學(xué)診斷
(1)病理剖檢變化。梅迪病病羊除明顯消瘦外,,病變主要出現(xiàn)于肺及局部淋巴結(jié),。剖檢可見肺明顯膨大,肺的體積和重量比正常肺大2~4倍,,肺和胸壁之間發(fā)生粘連,,胸膜和肺質(zhì)地變硬呈棕色或暗紅色,觸之有橡皮樣感,。肺小葉間質(zhì)明顯增寬,。肺切面干燥,透過漿膜可見到大量粟粒狀灰色小點(diǎn),??v膈淋巴結(jié)和支氣管淋巴結(jié)腫大和水腫?;季S斯納病的羊,,一般無眼觀變化,老齡羊的后肢骨骼肌顯著萎縮,,少數(shù)病例腦膜輕度充血,,或腦、脊髓切面有小的黃色斑點(diǎn),。關(guān)節(jié)的病變主要為滑液囊膜和黏液囊膜增生,,關(guān)節(jié)囊纖維化及關(guān)節(jié)軟骨和骨變性,發(fā)病關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)面干燥,,有纖維蛋白沉著,。乳房有硬節(jié)。
(2)病理組織學(xué)變化,。主要病變是間質(zhì)性肺炎,,在血管周圍、支氣管周圍或肺泡之間有淋巴樣細(xì)胞,、單核細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞呈彌漫性浸潤,伴有肺泡壁肥厚和淋巴樣細(xì)胞呈結(jié)節(jié)狀集聚,。維斯納病的初期病變呈彌漫性腦脊髓炎,,可見淋巴樣細(xì)胞或小膠質(zhì)細(xì)胞增生、浸潤或圍管性細(xì)胞浸潤,。早期在神經(jīng)組織見有星形膠質(zhì)細(xì)胞環(huán)繞血管的病灶,,隨著病程發(fā)展,病灶融合成片,,邊緣密度增強(qiáng)而中心則形成微小的空泡,。病變從初期的室管膜下廣泛地蔓延到腦和脊髓實(shí)質(zhì),。繼而小腦、大腦,、腦橋、延腦和脊髓等的白質(zhì)呈彌漫性脫鞘,。
4 病原學(xué)診斷
(1)病料的采集和處理,。無菌采集潛伏期和發(fā)病期病羊的脈絡(luò)叢、脾,、縱膈淋巴結(jié),、唾液腺、肺,、血液及腦脊髓液進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)和動物感染試驗,。
(2)分離培養(yǎng)。梅迪-維斯納病毒可以在綿羊的室管膜脈絡(luò)叢,、腎,、唾液腺和綿羊胎肺的原代、繼代和傳代細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)增殖,,其中以來源于綿羊室管膜脈絡(luò)叢細(xì)胞和綿羊胎肺細(xì)胞最常用,。將無菌或除菌后的病料接種于細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi),在2~3周內(nèi)產(chǎn)生細(xì)胞病變,,形成巨大的合胞體細(xì)胞(也稱多核巨細(xì)胞,、融合細(xì)胞),每個合胞體細(xì)胞中含有2~20個細(xì)胞核,,以合胞體細(xì)胞為中心,,周圍是折光性強(qiáng)的梭形細(xì)胞。病變細(xì)胞最后崩解,。經(jīng)過連續(xù)傳代后,,致細(xì)胞病變的時間可縮短到培養(yǎng)的第3~15天。經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)傳代的病毒對羊仍有致病力,。
(3)動物回歸試驗,。梅迪病采集病羊的肺制成懸液,經(jīng)鼻內(nèi),、胸腔或靜脈接種易感綿羊,,1個月后撲殺檢查,感染羊的肺出現(xiàn)梅迪病的病變,。維斯納病采集病羊組織制成懸液,,經(jīng)腦內(nèi)接種易感綿羊,1個月內(nèi)感染羊的腦脊髓液中淋巴細(xì)胞增多,,表現(xiàn)出維斯納病的神經(jīng)癥狀或病理組織學(xué)變化,。用梅迪病毒感染山羊,,出現(xiàn)腦炎、關(guān)節(jié)炎和間質(zhì)性進(jìn)行性肺炎,,并檢出抗體,。
(4)電子顯微鏡檢查。采取病羊的病變肺組織作超薄切片電鏡直接鏡檢,,或?qū)⒎谓M織制成乳劑后經(jīng)差速離心處理,,再以硫酸鎂或聚乙二醇濃縮,并通過柱層析提純后,,用磷鎢酸負(fù)染,。在電鏡下觀察病毒顆粒的形態(tài)特征。成熟的梅迪-維斯納病毒呈球形,,直徑為90~100nm,。病毒核心致密,直徑為30~40nm,。用感染細(xì)胞培養(yǎng)物做超薄切片電鏡觀察,,在感染細(xì)胞的周圍可見典型的病毒顆粒,呈球形,,直徑約95nm,,內(nèi)有2個或多個核芯,其絕大多數(shù)為圓形,,少數(shù)為桿形或錐形,。并可看到病毒粒子從感染細(xì)胞的細(xì)胞膜上釋放。
5 血清學(xué)診斷
已報道的血清學(xué)方法有中和試驗,、補(bǔ)體結(jié)合試驗,、被動血凝試驗、熒光抗體試驗,、免疫擴(kuò)散及酶聯(lián)免疫測定法等,。以感染的細(xì)胞培養(yǎng)物作為抗原,用補(bǔ)體結(jié)合試驗和中和試驗可檢測出病羊血清中的抗體,。補(bǔ)體結(jié)合抗體于感染后3~4周可被檢出,,中和抗體在感染后第2~3個月可被檢出,均能持續(xù)數(shù)年,。為了確定該病在畜群中的存在,,可以應(yīng)用免疫擴(kuò)散試驗,但對單個動物的確診,,應(yīng)聯(lián)合使用上述3種方法中的至少2種,。目前,廣泛應(yīng)用免疫擴(kuò)散試驗對羊群進(jìn)行監(jiān)測。
(孫麗麗 山東省榮成市蔭子畜牧獸醫(yī)站)