對種公豬采精后,,精液的品質(zhì)檢查和稀釋,、分裝、儲存,、運輸便成為重要環(huán)節(jié)。
1 精液品質(zhì)檢查
(1)采精量,。采集精液后稱重,,按每克1mL計,,避免以量筒等測量精液的體積。
(2)顏色,。正常的精液是乳白色或淺灰色,,精子密度越高,色澤愈濃,,透明度愈低,。帶有綠色、黃色,、淺紅色,、紅褐色等異常顏色的精液應廢棄。
(3)氣味,。豬精液略帶腥味,,如有異常氣味,應廢棄,。
(4)pH值(酸堿度),。以pH計或pH試紙測試,正常范圍為7.0~7.8,。
(5)精子活力檢查,。精子活力是指呈直線運動的精子所占百分率。在顯微鏡下觀察,,一般按0.1~1.0區(qū)間的10級評分法估計,,鮮精活力要求不低于0.7。檢查活力時要求載玻片和蓋玻片都應在 37℃下預熱,。
(6)精子密度,。指每毫升精液中所含的精子數(shù),是確定稀釋倍數(shù)的重要標準,。要求用血細胞計數(shù)板計數(shù)或精液密度儀測定,。血細胞計數(shù)方法:以微量加樣器取具有代表性原精液200uL,用3%NaCl稀釋10倍,;在血細胞計數(shù)板上放一蓋玻片,,取1滴稀釋液后精液置于計數(shù)板的槽中,靠虹吸將精液吸入計數(shù)室內(nèi),;在高倍鏡下計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子總數(shù),,將該數(shù)乘以50萬,即得到原精液每毫升所含的精子數(shù)(即精液密度),。
(7)精子畸形率,。畸形率是指異常精子的百分率,。一般要求畸形率不超過18%,。其測定可用普通顯微鏡,,但需伊紅或姬姆薩染色,利用相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率,。公豬使用過頻或在高溫環(huán)境下會出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子,。畸形精子種類很多,,如巨型精子,、短小精子、雙頭或雙尾精子,、頂體膨脹或脫落,、精子頭部殘缺或尾部分離、尾部變曲的精子等,。要求對每頭公豬每2周檢查一次精子畸形率,。
2 精液稀釋、分裝,、儲存和運輸
(1)稀釋液,。稀釋液按稀釋液配方配制,配好應及時貼上標簽,、標明品名,、配制日期、時間及經(jīng)手人等,。在冰箱內(nèi)4℃條件下保存,,不超過24小時。
(2)原精液稀釋后體積計算,。原精液總有效精子數(shù)=原精液體積(或重量g)×精子密度(單位:個/mL)×活率,。
原精液稀釋后的體積(或重量)=原精液稀釋后可分裝的份數(shù)(取整數(shù))×每份精液的體積(或重量)。每份精液中有效精子數(shù)推薦值為30億,,每份精液的體積推薦值為80~100mL,。
(3)精液稀釋,。精液采集后應盡快稀釋,,原精儲存不超過30分鐘。未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格(活力0.7以下)的精液不能稀釋,。稀釋液與精液要求等溫稀釋,,兩者溫差不超過1℃,即稀釋液應加熱至 33~37℃,,以精液溫度為標準,,來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,絕不能反過來操作,。稀釋時,,將一個塑料杯(1000~1500mL)放在電子秤上,,除皮后,將裝精液的采精袋從保溫杯中取出,,放入這個大塑料杯中,,并將袋口翻在杯外。如果集精容器為一次性紙杯,,則需將紙杯中的精液倒入裝入食品袋的塑料杯中并放在電子秤上,。也可在此時稱量并記錄精液重量。然后向杯中徐徐加入與精液等溫的稀釋液,,直到達到所計算出的最終重量,。稀釋倍數(shù)的確定。要求每個輸精劑量含有效精子數(shù)30億以上,。稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,,如果稀釋前后活力無太大變化,即可進行分裝與保存,。如果活力顯著下降,,則不要使用。
(4)精液分裝,。一次性輸精瓶的分裝,。是將塑料杯中稀釋后的精液分別加入不同的輸精瓶中,使精液面達到輸精瓶上相應的刻度處(如100mL),,然后擰上輸精瓶蓋,。一次性輸精袋分裝。將輸精袋的兩個懸掛孔掛在專門用于分裝精液的支架上,,在輸精袋中插上一次性塑料漏斗,,放在電子秤上,然后除皮,。將塑料杯中稀釋后的精液通過漏斗徐徐加入輸精袋中,,直到達到規(guī)定的重量(如100g),取下漏斗和輸精袋,,掛上一個新的輸精袋,,再將漏斗插入,分裝另一袋精液,。分裝后的輸精袋用塑料熱封口機封口,。在輸精瓶或袋上表明公豬品種、耳號,、生產(chǎn)日期,、保存有效期、稀釋液名稱和生產(chǎn)單位等。
(5)精液儲存,。將分裝后的輸精容器放入泡沫塑料盒中,,在室溫下緩慢降溫30分鐘,再將輸精容器放入17℃恒溫箱內(nèi)的擱架上保存,。保存過程中不要頻繁打開冰箱,,并且每隔12小時輕輕翻轉(zhuǎn)一次,防止精子沉淀而引起死亡,。短效稀釋液可保存3天,,中效稀釋液可保存4~6天,長效稀釋液可保存7~9天,,無論何種稀釋液保存精液,,都應盡快用完。
(6)精液運輸,。由于熱應激或冷應激,,以及紫外線的影響,精液品質(zhì)會發(fā)生變化,,使精子活力降低,。因此,精液運輸應置于保溫較好的裝置內(nèi),,保持在16~18℃,。精液運輸過程中應避免強烈震動。
(呂成繼 黑龍江省林口縣畜牧獸醫(yī)局動物疫病預防與控制中心)