
梭菌性疾病是由多種厭氧性芽孢梭菌經(jīng)過多種途徑感染引起多種動(dòng)物和人發(fā)病的一類急性(發(fā)病特別急),、中毒性(由毒素引起),、散發(fā)性(在牧場中不會(huì)造成接觸性感染)、致死性(一旦發(fā)生100%死亡),、非接觸性傳染病的總稱,。通常稱羊梭菌疾病或牛梭菌疾病。
一,、牛梭菌病分類
根據(jù)感染途徑,、臨床表現(xiàn)不同,牛的梭菌疾病可分為以下三類:
1.經(jīng)傷口感染引起的牛局部氣性水腫,、喘氣
(1)腐敗梭菌引起的惡性水腫,,是產(chǎn)后牛最容易發(fā)生的一種急性死亡性疾病。
(2)氣腫疽梭菌引起的氣性壞疽,,主要發(fā)生在成年牛,、青年牛的腿部、臀部,又叫黑白病,,觸診有摩擦音,。
(3)A型諾維氏梭菌引起的水腫。
(4)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的氣性壞疽,,在成年牛中不多見,,主要發(fā)生在犢牛。
(5)溶組織梭菌引起的氣性壞疽,。
2.經(jīng)消化道感染引起犢牛腸毒血癥及紅尿病
(1)A,、B、C,、D,、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起1月齡到周歲的犢牛腸毒血癥。其中,,最容易發(fā)生的是A型,、C型和D型。
(2)D型諾維氏菌主要引起出生7天內(nèi)的犢牛血紅素尿(紅尿?。?,該病在規(guī)模化牛場當(dāng)發(fā)生比例不高,。
3.經(jīng)毒素污染的食物引起人和動(dòng)物的食物中毒
(1)主要由A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起,。
(2)肉毒梭菌。
二,、牛梭菌病共同特點(diǎn)
1.發(fā)病機(jī)理相同,。均由外毒素致病,通過傷口或消化道感染細(xì)菌繁殖后產(chǎn)生毒素,,經(jīng)過血液循環(huán)進(jìn)入全身,、大腦、心血,,引起一系列中毒癥狀,。
2.免疫機(jī)理相同。以體液免疫為主,一旦發(fā)病,病牛早期可以用高免血清/抗毒素血清進(jìn)行治療,。
3.潛伏期、病程均較短,。一般情況下發(fā)病快的6~12小時(shí)死亡,大部分不超過36小時(shí)死亡,。發(fā)病快,,死亡也較快,。
4.死前均沒有特殊癥狀??赡茉绯空?、晚上死亡,或晚上正常,、早晨死在圈中,,看不到任何癥狀。但死亡后會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,,如眼球突出,、耳朵向后、四肢僵直,、角弓反張等,。
5.均有發(fā)病誘因。在了解和診斷梭菌病的主要誘因時(shí),,需要了解發(fā)病歷史,,如近期是否打過疫苗、是否做過手術(shù),、是否有其他外傷感染,、死亡犢牛是否采食過量造成消化不良而引起等,。
6.散發(fā),、非接觸性傳播。每過一段時(shí)間死一頭牛,,散發(fā)性是特點(diǎn),。
7.毒素檢測是最主要也是最準(zhǔn)確的確診依據(jù)。
三,、牛梭菌病的危害及發(fā)病現(xiàn)狀
近幾年,,各個(gè)牧場都非常重視牛的梭菌病,雖然其發(fā)病率不高,,但致死率很高,,一年累計(jì)下來損失很大。
1.牛梭菌病分布廣,,幾乎所有的牧場都可能發(fā)生,,因?yàn)榕5哪c道、牛舍環(huán)境,、糞便,、土壤中都可能帶細(xì)菌芽孢,所以梭菌病又稱為土源性傳染病,。特別是在陰雨連綿以及出現(xiàn)洪澇災(zāi)害時(shí),,芽孢一旦被沖出來污染飼草料后很容易爆發(fā)梭菌病,。
2.散發(fā),但致死率很高,。
3.疫苗是目前唯一有效的預(yù)防手段,。
4.多種病原體可導(dǎo)致人感染發(fā)病,危害人體健康與食品安全,,如A型魏氏梭菌可引起人傷口感染也可造成牛奶食品污染,。在牧場一定要佩戴手套,手指頭出現(xiàn)傷口后一定要消毒,,防止A型魏氏梭菌引起氣性壞疽,。
四、牛梭菌病防控存在的問題
1.是否使用疫苗,,舉棋不定,。目前基本上不管大小型牧場都在使用梭菌疫苗。
2.發(fā)病誘因比較多,,難以管控,。這是一個(gè)普遍存在的問題。
3.牧場現(xiàn)場診斷存在不確定性,。如急性死亡的不一定是由梭菌引起,,需要根據(jù)其他癥狀共同進(jìn)行鑒別。梭菌病主要是在現(xiàn)場根據(jù)流行病學(xué),、死亡時(shí)間,、剖解變化等初步診斷。如果送檢,,結(jié)論存在一定的不確定性,,因?yàn)樗蜋z的病料、檢測方法,、檢測目標(biāo)等都會(huì)存在差異,。
4.對(duì)于動(dòng)物的梭菌病尚沒有行業(yè)認(rèn)可的快速檢測方法。目前能使用的方法只有兩種:第一種是快速鏡檢,,盡快采集死亡牛的脾臟,、肝臟或水腫液體、組織,,檢測是否有腐敗梭菌,,其他梭菌無效;第二種是PCR方法,,檢測組織液中的毒素進(jìn)行診斷,。
5.疫苗效果評(píng)價(jià)體系還有待建立。我國目前沒有疫苗抗體檢測方法,,注射完梭菌疫苗后2~3周抗體水平達(dá)到30%為合格,。希望盡快建立疫苗效果評(píng)價(jià)體系,,為疫苗免疫提供技術(shù)支撐。
6.新型疫苗研發(fā)比較滯后?,F(xiàn)在使用的疫苗是全菌體疫苗,,未來的疫苗一定是類毒素、毒素,、毒素亞單位疫苗,。每一種梭菌疾病的主要毒素已經(jīng)確定,克隆毒素后通過原核或真核表達(dá),,產(chǎn)生的亞肝疫苗,、毒素亞肝疫苗更有針對(duì)性、更安全,、效果更好,。
五、犢牛產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)毒血癥
1.病原特性
(1)形態(tài)特征:G+帶莢膜單在,、兩端鈍圓大桿菌,。
(2)培養(yǎng)特征:專性厭氧,在羊鮮血平板上菌落呈“雙溶血環(huán)”,。
(3)存在部位:牛腸道,、糞便、環(huán)境,、土壤中,,主要是芽孢。死亡后偶見肝,、脾中存在,。
(4)致病性:A,、B,、C、D,、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌均可致病,,可分泌α、β,、ε,、ι毒素,其中A型含有α毒素,,B型含有α,、β、ε毒素,,C型含有α,、β毒素,,D型含有α、ε毒素,,E型含有ι毒素,。ε毒素在胰蛋白酶作用下被激活,引起腸毒血癥,,也就是說大部分犢牛死亡,,出現(xiàn)碳水化物采食較多的,一般都是由ε毒素所引起,。
(5)抵抗力:細(xì)菌芽孢可耐受高溫(90℃)和干燥,,但對(duì)多種化學(xué)消毒劑敏感。氯制劑有效,。
2.流行特點(diǎn)
(1)流行方式:散發(fā),、地方性、爆發(fā),。
(2)感染途徑:消化道感染,。
(3)多發(fā)日齡與體況:1~16周齡犢牛均可發(fā)生。1~2月齡和斷奶后兩個(gè)階段高發(fā),。生長較快,、攝乳量和采食量較多的肥壯犢牛如果出現(xiàn)急性死亡,首先懷疑梭菌,。
(4)誘發(fā)因素:碳水化合物,、蛋白質(zhì)飼料攝入過多(飽食)引起的消化不良;大腸桿菌,、冠狀病毒感染,;菌群失調(diào)。
3.診斷要點(diǎn)
(1)臨床與病史調(diào)查:發(fā)病牛的日齡,、體況,、死前癥狀(血便)、病程,、免疫狀況,。
(2)尸體剖檢:剖解前觀察到角弓反張,剖解后發(fā)現(xiàn)小腸(空腸段)漿膜和黏膜出血,、壞死,,腸液呈茶色帶血;腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大,、出血,;腎水腫變形,切開后液體流出,,心外膜出血,,腦脊液增多,。剖解疑似梭菌病的犢牛,除了觀察死亡后的臨床尸體表現(xiàn)外,,重點(diǎn)觀察腸道和腎臟,。
(3)實(shí)驗(yàn)室診斷:①毒素測定:小腸內(nèi)容物送檢(20mL,12小時(shí)內(nèi)),檢測毒素,。方法:小鼠或家兔靜脈注射,,毒素中和試驗(yàn)。②肝臟組織或脾臟組織進(jìn)行PCR,、熒光抗體檢測,。③腸內(nèi)容物PCR檢測毒素,這是最可靠的一種方法,。
(4)鑒別診斷:1~16周齡犢牛一旦出現(xiàn)死亡,,均與梭菌病有關(guān)。如李氏桿菌性腦炎,,大腸桿菌性腦炎,,腸球菌性腦炎,IBR-腦炎型,;冠狀病毒腹瀉,、沙門氏菌性腸炎、BVD-血便,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)疫苗接種:牛梭菌多聯(lián)滅活菌苗(六聯(lián)九防),。干奶期注射一次,防止出現(xiàn)難產(chǎn),;產(chǎn)前1個(gè)月加強(qiáng)一次,。犢牛3~4月齡注射一次,防止發(fā)病,。
(2)發(fā)病治療:可以使用抗血清,,但價(jià)格較高,而且量不多,。
六,、孕牛惡性水腫
1.病原特性:腐敗梭菌
(1)形態(tài)特征:G+無莢膜芽孢梭菌,。死亡牛肝或羊肝表面觸片染色鏡檢呈長絲狀,;肉湯培養(yǎng)物呈單在芽孢居中橢圓形桿菌。
(2)培養(yǎng)特征:一般不做培養(yǎng),,顯示器快速診斷即可,。如果培養(yǎng),在LB血平板上呈“紐扣狀”,,邊緣呈放射狀菌落,。
(3)存在部位:腸道,、環(huán)境、土壤,,病死牛肝,、脾、腹水中,。病死牛的肝臟,、脾臟中可以檢測到細(xì)菌,但必須是夏天死亡6小時(shí)內(nèi),、冬天死亡12小時(shí)內(nèi)檢測,。
(4)致病性:可分泌α、β,、γ,、δ這4種外毒素,其中α毒素為耐氧的溶血素,,是主要毒素,,可致宿主細(xì)胞壞死、溶解,。
2.流行特點(diǎn)
(1)易感牛:懷孕牛,、成母牛。
(2)傳染途徑:主要通過傷口感染,,如助產(chǎn),、免疫注射、治療,、手術(shù),、胃腸道損傷。
(3)發(fā)病誘因:難產(chǎn)助產(chǎn)時(shí)消毒不嚴(yán),,助產(chǎn)后未及時(shí)使用抗生素,;分娩時(shí)地面環(huán)境衛(wèi)生不良導(dǎo)致傷口感染。
3.診斷要點(diǎn)
(1)病史及尸體變化:創(chuàng)傷史,。突然死亡,,死前無任何癥狀(區(qū)分牛出敗,牛在死前一定有癥狀,,而且一定會(huì)出現(xiàn)體溫升高,、呼吸加快)。死后局部炎性水腫,,特別是產(chǎn)道,、肛門周圍、臀部、大腿有水腫或氣腫,,切開后流出污紅色滲出液,,尸體易腐敗,但無迅速軟化及天然孔出血(區(qū)別炭疽),。
(2)實(shí)驗(yàn)室診斷:肝表面觸片瑞特氏染色鏡檢最準(zhǔn)確,,染色后發(fā)現(xiàn)晶體即可確診。另外,,抽取局部水腫液和肝組織進(jìn)行PCR檢測,,檢出毒素種類。肝組織分離培養(yǎng)(12小時(shí)內(nèi)冷藏送檢)一般不做,。毒素致病力測定,,病料和培養(yǎng)物小鼠腹腔注射。肝組織熒光抗體檢測,。(3)鑒別診斷
炭疽:尸體變化(尸僵不全,、天然孔出血、血凝不良),,耳組織涂片鏡檢,,帶莢膜、竹節(jié)狀兩端平直的大桿菌,。牧場很少發(fā)生,,但發(fā)生洪澇災(zāi)害或周邊牧場發(fā)生某些炭疽病例時(shí),需要重點(diǎn)關(guān)注,,一般比較容易分辨,。
牛出敗:運(yùn)輸應(yīng)激,、氣候變化或其他誘因,,死前體溫升高41℃以上,極度呼吸困難,,持續(xù)至少24~36小時(shí),。鼻腔流出帶泡沫鮮血,主要由肺臟出血引起,。心血涂片可見兩級(jí)濃染巴氏桿菌,。
氣腫疽:肌肉豐滿的局部如腿部、大腿部出現(xiàn)氣性海棉狀腫脹,。PCR檢測,,注射器吸0.5~1毫升生理鹽水注射進(jìn)去再抽出來,可以測定局部是否含毒素,。
急性酸中毒,、低鈣血癥,、急性酮?。簢a(chǎn)期孕牛及新產(chǎn)牛多發(fā),。使用碳酸氫鈉、葡萄糖酸鈣,、葡萄糖靜脈注射有效,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)免疫接種:同前。所有梭菌疫苗接種都一樣,。
(2)避免外傷:助產(chǎn)時(shí)衛(wèi)生消毒,,術(shù)后及時(shí)使用抗生素,免疫注射時(shí)一定要做好針頭衛(wèi)生,。建議一個(gè)針頭注射一針,。
(3)環(huán)境控制:牛舍、產(chǎn)房的衛(wèi)生與消毒,。(4)早期治療:可以采用大劑量青霉素靜脈肌注,,但效果甚微。
5.人的感染
根據(jù)國外文獻(xiàn)報(bào)道,,腐敗梭菌可引起人的胰腺炎,、壞死性腸炎、結(jié)腸癌等,。牧場應(yīng)做好牛舍糞污清除及無害化處理,,關(guān)注公共衛(wèi)生安全。
七,、青年牛氣腫疽及惡性水腫
1.病原特性
主要是氣腫疽梭菌,、A型諾維氏菌、A型魏氏梭菌,,都會(huì)引起青年牛局部氣腫和壞疽,。
(1)形態(tài)特征:均為革蘭氏陽性厭氧芽孢桿菌,無莢膜(A型魏氏梭菌有莢膜),。
(2)存在部位:環(huán)境,、土壤、糞便,、腸道中,。死后存在于肝、脾中,。
(3)致病性:可產(chǎn)生α,、β、γ,、δ,、ε等不同的8種毒素,。氣腫疽含前4種,A型魏氏梭菌含α毒素,,對(duì)小鼠,、豚鼠、家兔均有致病力,,其中氣腫疽梭菌對(duì)小鼠致病力弱,,對(duì)家兔不致病。
2.流行特點(diǎn)
(1)通過傷口感染,。(2)多發(fā)于青年牛,,以2歲下多發(fā)。氣腫疽多發(fā)于肉牛和放牧牛,。
3.診斷要點(diǎn)
(1)了解皮膚外傷史,,確認(rèn)有無傷口。
(2)臨床特征:氣腫疽病程比惡性水腫稍長,,持續(xù)2~3天,。病牛死前表現(xiàn)體溫升高到41℃以上,出現(xiàn)瘸腿跛行,、渾身發(fā)抖,,有時(shí)全身劇烈抽搐。局部肌肉(大腿,、臂部,、頸部、胸部,、腹下)出現(xiàn)氣性腫脹(捻發(fā)音),,組織壞死呈紫色(黑腿病、氣性壞疽),。
(3)病理變化:切開腫脹部位后,,流出黃色帶氣泡的膠樣液體,切面呈海綿狀,。
(4)確診需要進(jìn)行病變組織,、肝、脾臟PCR檢測或熒光抗體檢測,。
(5)病料分離培養(yǎng),、病料和培養(yǎng)物動(dòng)物接種(小鼠、豚鼠,、家兔同時(shí)注射)一般不做,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)免疫接種牛梭菌多聯(lián)滅活苗。
(2)防止牛只出現(xiàn)外傷,。
八,、總結(jié)
牛梭菌性疾病在牛場中雖然不構(gòu)成流行,,但因致死率較高而給牧場帶來一定的危害。是否接種疫苗需要根據(jù)牧場該病的歷年發(fā)生情況來定,。發(fā)病率累計(jì)較高的情況下,,疫苗接種是當(dāng)前唯一有效的防控措施。
牧場是否存在梭菌性疾病的風(fēng)險(xiǎn),,應(yīng)以臨床病例診斷和實(shí)驗(yàn)室確診病例數(shù)來評(píng)估疾病的存在,。
作為科研單位和高校,,建立快速準(zhǔn)確的診斷方法,、疫苗效果評(píng)價(jià)體系是今后科研的主攻方向。而研發(fā)新型的疫苗是今后疫苗廠家的主攻方向,。
(本文根據(jù)天康制藥主辦的“冬季牛呼吸道及梭菌病防控專場”專家講課內(nèi)容整理)