梭菌疾病是一種古老的疾病,,多年來(lái)主要發(fā)生在羊群中,,是羊非常重要的一種疾病。牛梭菌病和羊梭菌病的病原特性非常相似,。近幾年隨著養(yǎng)殖規(guī)模增大,、密度增加、疫苗注射等各種外界誘因,,造成牛梭菌疾病在牧場(chǎng)頻繁發(fā)生,,才引起牧場(chǎng)高度重視。
梭菌性疾病是由多種厭氧性芽孢梭菌經(jīng)過(guò)多種途徑感染引起多種動(dòng)物和人發(fā)病的一類急性(發(fā)病特別急),、中毒性(由毒素引起),、散發(fā)性(在牧場(chǎng)中不會(huì)造成接觸性感染)、致死性(一旦發(fā)生100%死亡),、非接觸性傳染病的總稱,。通常稱羊梭菌疾病或牛梭菌疾病。
一,、牛梭菌病分類
根據(jù)感染途徑,、臨床表現(xiàn)不同,,牛的梭菌疾病可分為以下三類:
1.經(jīng)傷口感染引起的牛局部氣性水腫、喘氣
(1)腐敗梭菌引起的惡性水腫,,是產(chǎn)后牛最容易發(fā)生的一種急性死亡性疾病,。
(2)氣腫疽梭菌引起的氣性壞疽,主要發(fā)生在成年牛,、青年牛的腿部,、臀部,又叫黑白病,,觸診有摩擦音,。
(3)A型諾維氏梭菌引起的水腫。
(4)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的氣性壞疽,,在成年牛中不多見(jiàn),,主要發(fā)生在犢牛。
(5)溶組織梭菌引起的氣性壞疽,。
2.經(jīng)消化道感染引起犢牛腸毒血癥及紅尿病
(1)A,、B、C,、D,、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起1月齡到周歲的犢牛腸毒血癥。其中,,最容易發(fā)生的是A型,、C型和D型。
(2)D型諾維氏菌主要引起出生7天內(nèi)的犢牛血紅素尿(紅尿?。?,該病在規(guī)模化牛場(chǎng)當(dāng)發(fā)生比例不高,。
3.經(jīng)毒素污染的食物引起人和動(dòng)物的食物中毒
(1)主要由A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起,。
(2)肉毒梭菌。
二,、牛梭菌病共同特點(diǎn)
1.發(fā)病機(jī)理相同,。均由外毒素致病,通過(guò)傷口或消化道感染細(xì)菌繁殖后產(chǎn)生毒素,,經(jīng)過(guò)血液循環(huán)進(jìn)入全身、大腦,、心血,,引起一系列中毒癥狀。
2.免疫機(jī)理相同,。以體液免疫為主,,一旦發(fā)病,,病牛早期可以用高免血清/抗毒素血清進(jìn)行治療。
3.潛伏期,、病程均較短,。一般情況下發(fā)病快的6~12小時(shí)死亡,大部分不超過(guò)36小時(shí)死亡,。發(fā)病快,,死亡也較快。
4.死前均沒(méi)有特殊癥狀,??赡茉绯空!⑼砩纤劳?,或晚上正常,、早晨死在圈中,看不到任何癥狀,。但死亡后會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,,如眼球突出、耳朵向后,、四肢僵直,、角弓反張等。
5.均有發(fā)病誘因,。在了解和診斷梭菌病的主要誘因時(shí),,需要了解發(fā)病歷史,如近期是否打過(guò)疫苗,、是否做過(guò)手術(shù),、是否有其他外傷感染、死亡犢牛是否采食過(guò)量造成消化不良而引起等,。
6.散發(fā),、非接觸性傳播。每過(guò)一段時(shí)間死一頭牛,,散發(fā)性是特點(diǎn),。
7.毒素檢測(cè)是最主要也是最準(zhǔn)確的確診依據(jù)。
三,、牛梭菌病的危害及發(fā)病現(xiàn)狀
近幾年,,各個(gè)牧場(chǎng)都非常重視牛的梭菌病,雖然其發(fā)病率不高,,但致死率很高,,一年累計(jì)下來(lái)?yè)p失很大。
1.牛梭菌病分布廣,幾乎所有的牧場(chǎng)都可能發(fā)生,,因?yàn)榕5哪c道,、牛舍環(huán)境、糞便,、土壤中都可能帶細(xì)菌芽孢,,所以梭菌病又稱為土源性傳染病。特別是在陰雨連綿以及出現(xiàn)洪澇災(zāi)害時(shí),,芽孢一旦被沖出來(lái)污染飼草料后很容易爆發(fā)梭菌病,。
2.散發(fā),但致死率很高,。
3.疫苗是目前唯一有效的預(yù)防手段,。
4.多種病原體可導(dǎo)致人感染發(fā)病,危害人體健康與食品安全,,如A型魏氏梭菌可引起人傷口感染也可造成牛奶食品污染,。在牧場(chǎng)一定要佩戴手套,手指頭出現(xiàn)傷口后一定要消毒,,防止A型魏氏梭菌引起氣性壞疽,。
四、牛梭菌病防控存在的問(wèn)題
1.是否使用疫苗,,舉棋不定,。目前基本上不管大小型牧場(chǎng)都在使用梭菌疫苗。
2.發(fā)病誘因比較多,,難以管控,。這是一個(gè)普遍存在的問(wèn)題。
3.牧場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)診斷存在不確定性,。如急性死亡的不一定是由梭菌引起,,需要根據(jù)其他癥狀共同進(jìn)行鑒別。梭菌病主要是在現(xiàn)場(chǎng)根據(jù)流行病學(xué),、死亡時(shí)間,、剖解變化等初步診斷。如果送檢,,結(jié)論存在一定的不確定性,,因?yàn)樗蜋z的病料、檢測(cè)方法,、檢測(cè)目標(biāo)等都會(huì)存在差異,。
4.對(duì)于動(dòng)物的梭菌病尚沒(méi)有行業(yè)認(rèn)可的快速檢測(cè)方法。目前能使用的方法只有兩種:第一種是快速鏡檢,,盡快采集死亡牛的脾臟,、肝臟或水腫液體、組織,檢測(cè)是否有腐敗梭菌,,其他梭菌無(wú)效;第二種是PCR方法,,檢測(cè)組織液中的毒素進(jìn)行診斷,。
5.疫苗效果評(píng)價(jià)體系還有待建立。我國(guó)目前沒(méi)有疫苗抗體檢測(cè)方法,,注射完梭菌疫苗后2~3周抗體水平達(dá)到30%為合格,。希望盡快建立疫苗效果評(píng)價(jià)體系,為疫苗免疫提供技術(shù)支撐,。
6.新型疫苗研發(fā)比較滯后?,F(xiàn)在使用的疫苗是全菌體疫苗,未來(lái)的疫苗一定是類毒素,、毒素,、毒素亞單位疫苗。每一種梭菌疾病的主要毒素已經(jīng)確定,,克隆毒素后通過(guò)原核或真核表達(dá),,產(chǎn)生的亞肝疫苗、毒素亞肝疫苗更有針對(duì)性,、更安全,、效果更好。
五,、犢牛產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)毒血癥
1.病原特性
(1)形態(tài)特征:G+帶莢膜單在,、兩端鈍圓大桿菌。
(2)培養(yǎng)特征:專性厭氧,,在羊鮮血平板上菌落呈“雙溶血環(huán)”,。
(3)存在部位:牛腸道、糞便,、環(huán)境,、土壤中,主要是芽孢,。死亡后偶見(jiàn)肝,、脾中存在。
(4)致病性:A,、B,、C、D,、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌均可致病,,可分泌α、β、ε,、ι毒素,,其中A型含有α毒素,B型含有α,、β,、ε毒素,C型含有α,、β毒素,,D型含有α、ε毒素,,E型含有ι毒素,。ε毒素在胰蛋白酶作用下被激活,引起腸毒血癥,,也就是說(shuō)大部分犢牛死亡,,出現(xiàn)碳水化物采食較多的,一般都是由ε毒素所引起,。
(5)抵抗力:細(xì)菌芽孢可耐受高溫(90℃)和干燥,,但對(duì)多種化學(xué)消毒劑敏感。氯制劑有效,。
2.流行特點(diǎn)
(1)流行方式:散發(fā),、地方性、爆發(fā),。
(2)感染途徑:消化道感染,。
(3)多發(fā)日齡與體況:1~16周齡犢牛均可發(fā)生。1~2月齡和斷奶后兩個(gè)階段高發(fā),。生長(zhǎng)較快,、攝乳量和采食量較多的肥壯犢牛如果出現(xiàn)急性死亡,首先懷疑梭菌,。
(4)誘發(fā)因素:碳水化合物,、蛋白質(zhì)飼料攝入過(guò)多(飽食)引起的消化不良;大腸桿菌,、冠狀病毒感染,;菌群失調(diào)。
3.診斷要點(diǎn)
(1)臨床與病史調(diào)查:發(fā)病牛的日齡,、體況,、死前癥狀(血便)、病程,、免疫狀況,。
(2)尸體剖檢:剖解前觀察到角弓反張,,剖解后發(fā)現(xiàn)小腸(空腸段)漿膜和黏膜出血、壞死,,腸液呈茶色帶血,;腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大、出血,;腎水腫變形,,切開(kāi)后液體流出,心外膜出血,,腦脊液增多。剖解疑似梭菌病的犢牛,,除了觀察死亡后的臨床尸體表現(xiàn)外,,重點(diǎn)觀察腸道和腎臟。
(3)實(shí)驗(yàn)室診斷:①毒素測(cè)定:小腸內(nèi)容物送檢(20mL,12小時(shí)內(nèi)),,檢測(cè)毒素,。方法:小鼠或家兔靜脈注射,毒素中和試驗(yàn),。②肝臟組織或脾臟組織進(jìn)行PCR,、熒光抗體檢測(cè)。③腸內(nèi)容物PCR檢測(cè)毒素,,這是最可靠的一種方法,。
(4)鑒別診斷:1~16周齡犢牛一旦出現(xiàn)死亡,均與梭菌病有關(guān),。如李氏桿菌性腦炎,,大腸桿菌性腦炎,腸球菌性腦炎,,IBR-腦炎型,;冠狀病毒腹瀉、沙門(mén)氏菌性腸炎,、BVD-血便,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)疫苗接種:牛梭菌多聯(lián)滅活菌苗(六聯(lián)九防)。干奶期注射一次,,防止出現(xiàn)難產(chǎn),;產(chǎn)前1個(gè)月加強(qiáng)一次。犢牛3~4月齡注射一次,,防止發(fā)病,。
(2)發(fā)病治療:可以使用抗血清,但價(jià)格較高,,而且量不多,。
六,、孕牛惡性水腫
1.病原特性:腐敗梭菌
(1)形態(tài)特征:G+無(wú)莢膜芽孢梭菌。死亡牛肝或羊肝表面觸片染色鏡檢呈長(zhǎng)絲狀,;肉湯培養(yǎng)物呈單在芽孢居中橢圓形桿菌,。
(2)培養(yǎng)特征:一般不做培養(yǎng),顯示器快速診斷即可,。如果培養(yǎng),,在LB血平板上呈“紐扣狀”,邊緣呈放射狀菌落,。
(3)存在部位:腸道,、環(huán)境、土壤,,病死牛肝,、脾、腹水中,。病死牛的肝臟,、脾臟中可以檢測(cè)到細(xì)菌,但必須是夏天死亡6小時(shí)內(nèi),、冬天死亡12小時(shí)內(nèi)檢測(cè),。
(4)致病性:可分泌α、β,、γ,、δ這4種外毒素,其中α毒素為耐氧的溶血素,,是主要毒素,,可致宿主細(xì)胞壞死、溶解,。
2.流行特點(diǎn)
(1)易感牛:懷孕牛,、成母牛。
(2)傳染途徑:主要通過(guò)傷口感染,,如助產(chǎn),、免疫注射、治療,、手術(shù),、胃腸道損傷。
(3)發(fā)病誘因:難產(chǎn)助產(chǎn)時(shí)消毒不嚴(yán),,助產(chǎn)后未及時(shí)使用抗生素,;分娩時(shí)地面環(huán)境衛(wèi)生不良導(dǎo)致傷口感染。
3.診斷要點(diǎn)
(1)病史及尸體變化:創(chuàng)傷史,。突然死亡,,死前無(wú)任何癥狀(區(qū)分牛出敗,,牛在死前一定有癥狀,而且一定會(huì)出現(xiàn)體溫升高,、呼吸加快),。死后局部炎性水腫,特別是產(chǎn)道,、肛門(mén)周圍,、臀部、大腿有水腫或氣腫,,切開(kāi)后流出污紅色滲出液,,尸體易腐敗,但無(wú)迅速軟化及天然孔出血(區(qū)別炭疽),。
(2)實(shí)驗(yàn)室診斷:肝表面觸片瑞特氏染色鏡檢最準(zhǔn)確,,染色后發(fā)現(xiàn)晶體即可確診。另外,,抽取局部水腫液和肝組織進(jìn)行PCR檢測(cè),檢出毒素種類,。肝組織分離培養(yǎng)(12小時(shí)內(nèi)冷藏送檢)一般不做,。毒素致病力測(cè)定,病料和培養(yǎng)物小鼠腹腔注射,。肝組織熒光抗體檢測(cè),。(3)鑒別診斷
炭疽:尸體變化(尸僵不全、天然孔出血,、血凝不良),,耳組織涂片鏡檢,帶莢膜,、竹節(jié)狀兩端平直的大桿菌,。牧場(chǎng)很少發(fā)生,但發(fā)生洪澇災(zāi)害或周邊牧場(chǎng)發(fā)生某些炭疽病例時(shí),,需要重點(diǎn)關(guān)注,,一般比較容易分辨。
牛出?。哼\(yùn)輸應(yīng)激,、氣候變化或其他誘因,死前體溫升高41℃以上,,極度呼吸困難,,持續(xù)至少24~36小時(shí)。鼻腔流出帶泡沫鮮血,,主要由肺臟出血引起,。心血涂片可見(jiàn)兩級(jí)濃染巴氏桿菌,。
氣腫疽:肌肉豐滿的局部如腿部、大腿部出現(xiàn)氣性海棉狀腫脹,。PCR檢測(cè),,注射器吸0.5~1毫升生理鹽水注射進(jìn)去再抽出來(lái),可以測(cè)定局部是否含毒素,。
急性酸中毒,、低鈣血癥、急性酮?。簢a(chǎn)期孕牛及新產(chǎn)牛多發(fā),。使用碳酸氫鈉、葡萄糖酸鈣,、葡萄糖靜脈注射有效,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)免疫接種:同前。所有梭菌疫苗接種都一樣,。
(2)避免外傷:助產(chǎn)時(shí)衛(wèi)生消毒,,術(shù)后及時(shí)使用抗生素,免疫注射時(shí)一定要做好針頭衛(wèi)生,。建議一個(gè)針頭注射一針,。
(3)環(huán)境控制:牛舍、產(chǎn)房的衛(wèi)生與消毒,。(4)早期治療:可以采用大劑量青霉素靜脈肌注,,但效果甚微。
5.人的感染
根據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道,,腐敗梭菌可引起人的胰腺炎,、壞死性腸炎、結(jié)腸癌等,。牧場(chǎng)應(yīng)做好牛舍糞污清除及無(wú)害化處理,,關(guān)注公共衛(wèi)生安全。
七,、青年牛氣腫疽及惡性水腫
1.病原特性
主要是氣腫疽梭菌,、A型諾維氏菌、A型魏氏梭菌,,都會(huì)引起青年牛局部氣腫和壞疽,。
(1)形態(tài)特征:均為革蘭氏陽(yáng)性厭氧芽孢桿菌,無(wú)莢膜(A型魏氏梭菌有莢膜),。
(2)存在部位:環(huán)境,、土壤、糞便,、腸道中,。死后存在于肝,、脾中。
(3)致病性:可產(chǎn)生α,、β,、γ、δ,、ε等不同的8種毒素,。氣腫疽含前4種,A型魏氏梭菌含α毒素,,對(duì)小鼠,、豚鼠、家兔均有致病力,,其中氣腫疽梭菌對(duì)小鼠致病力弱,,對(duì)家兔不致病。
2.流行特點(diǎn)
(1)通過(guò)傷口感染,。(2)多發(fā)于青年牛,,以2歲下多發(fā)。氣腫疽多發(fā)于肉牛和放牧牛,。
3.診斷要點(diǎn)
(1)了解皮膚外傷史,,確認(rèn)有無(wú)傷口。
(2)臨床特征:氣腫疽病程比惡性水腫稍長(zhǎng),,持續(xù)2~3天。病牛死前表現(xiàn)體溫升高到41℃以上,,出現(xiàn)瘸腿跛行,、渾身發(fā)抖,有時(shí)全身劇烈抽搐,。局部肌肉(大腿,、臂部、頸部,、胸部,、腹下)出現(xiàn)氣性腫脹(捻發(fā)音),組織壞死呈紫色(黑腿病,、氣性壞疽),。
(3)病理變化:切開(kāi)腫脹部位后,流出黃色帶氣泡的膠樣液體,,切面呈海綿狀,。
(4)確診需要進(jìn)行病變組織、肝,、脾臟PCR檢測(cè)或熒光抗體檢測(cè),。
(5)病料分離培養(yǎng),、病料和培養(yǎng)物動(dòng)物接種(小鼠、豚鼠,、家兔同時(shí)注射)一般不做,。
4.防疫要點(diǎn)
(1)免疫接種牛梭菌多聯(lián)滅活苗。
(2)防止牛只出現(xiàn)外傷,。
八,、總結(jié)
牛梭菌性疾病在牛場(chǎng)中雖然不構(gòu)成流行,但因致死率較高而給牧場(chǎng)帶來(lái)一定的危害,。是否接種疫苗需要根據(jù)牧場(chǎng)該病的歷年發(fā)生情況來(lái)定,。發(fā)病率累計(jì)較高的情況下,疫苗接種是當(dāng)前唯一有效的防控措施,。
牧場(chǎng)是否存在梭菌性疾病的風(fēng)險(xiǎn),,應(yīng)以臨床病例診斷和實(shí)驗(yàn)室確診病例數(shù)來(lái)評(píng)估疾病的存在。
作為科研單位和高校,,建立快速準(zhǔn)確的診斷方法,、疫苗效果評(píng)價(jià)體系是今后科研的主攻方向。而研發(fā)新型的疫苗是今后疫苗廠家的主攻方向,。
(本文根據(jù)天康制藥主辦的“冬季牛呼吸道及梭菌病防控專場(chǎng)”專家講課內(nèi)容整理)